C—myc在肺鳞癌、腺癌中的表达及其对淋巴结转移的预测价值

[摘 要] 目的：分析C-myc基因在肺鳞癌、腺癌中的表达及其对淋巴结转移的预测价值，为肺鳞腺癌淋巴结转移的预测提供参考。方法：选择51例肺鳞癌、45例肺腺癌及其癌旁组织标本，使用免疫组化法检测标本原癌基因C-myc表达，并分析其与患者病理类型、组织分化程度、病理分期及淋巴结转移的关系。结果：肺鳞癌组织C-myc阳性率为70.59%（36/51），高于癌旁组织的11.76%（6/51），差异有统计学意义（P<0.05）；不同淋巴结转移状态肺鳞癌组织C-myc表达比较，差异有统计学意义（P<0.05）。肺腺癌组织C-myc阳性率为91.11%（41/45），高于癌旁组织的15.56%（7/45），差异有统计学意义（P<0.05）；不同临床病理特征肺腺癌组织C-myc表达比较，差异无统计学意义（P>0.05）。肺腺癌C-myc阳性率高于肺鳞癌，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：C-myc在肺鳞癌、腺癌病灶中阳性表达率均高于癌旁组织，其表达水平与肺鳞癌患者淋巴结转移状态具有一定关联。

[关键词] C-myc；原癌基因；肺鳞癌；肺腺癌；淋巴结转移；预测

中图分类号：R734.2 文献标识码：A 文章编号：2095-5200（2017）01-085-03

DOI：10.11876/mimt201701034

作为呼吸系统最常见的恶性肿瘤之一，肺癌的发生、发展是一个多因素、多步骤、多阶段和多基因改变的过程，癌基因激活、抑癌基因、DNA修复基因突变或缺失与肿瘤的发生发展具有密切关联[1]。C-myc是原癌基因myc家族中的一员，也是近年来分子生物学研究的热点，既往研究发现，C-myc在子宫内膜癌、胰腺癌、乳腺癌等多种肿瘤的生长、黏附、迁移中均扮演了重要角色[2-3]。但关于C-myc与肺癌关系的研究较为缺乏，因此，本研究选择肺鳞癌、肺腺癌患者癌及癌旁组织标本，了解C-myc在肺鳞癌、腺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系。

1 材料与方法

1.1 标本选择

51例肺鳞癌、45例肺腺癌患者，入选患者根据国际抗癌联盟颁布的肺癌TNM分期标准[4]临床分期I～Ⅳ期，排除标本来源合并其他恶性肿瘤及系统性疾病者[5]。51例肺鳞癌患者中男29例，女22例，年龄46～71岁，平均（58.26±6.44）岁，组织分化程度：高分化15例，中分化19例，低分化17例；TNM分期：Ⅰ期24例，Ⅱ期14例，Ⅲ/Ⅳ期13例；淋巴结转移阳性25例。45例肺腺癌患者中男24例，女21例，年龄43～75岁，平均（57.92±6.39）岁，组织分化程度：高分化13例，中分化15例，低分化17例；TNM分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期11例，Ⅲ/Ⅳ期14例；淋巴结转移阳性23例。

1.2 染色方法

取患者癌及癌旁2cm以上正常组织，标本均使用10%中性甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，置于涂有多聚赖氨酸的防脱载玻片上，70℃恒温烘烤2～3 h，而后采用二步法免疫组化染色[6]，操作方法严格按照通用型PV6000试剂盒（北京中杉生物试剂公司），抗C-myc单克隆抗体由福州迈新生物技术开发有限公司提供，以PBS溶液代替一抗作为阴性对照，阳性对照由购买试剂公司提供。

1.3 结果判定

采取Garcia半定量法进行染色结果判定，随机观察10个高倍镜视野，以阳性细胞（胞核或胞质内可见淡黄色至棕黄色颗粒）百分比计分：0分：未见阳性细胞；1分：阳性细胞百分比<25%；2分：阳性细胞百分比25%～50%；3分：阳性细胞百分比50%～75%；4分：阳性细胞百分比>75%。以着色强度计分：0分：未着色；1分：淡黄色染色；2分：棕黄色染色。阳性细胞百分比计分、着色强度计分的乘积为总分，根据总分判断染色结果[7-8]：阴性：0～1分；阳性：2～8分（2～4分为弱阳性，5～8分为强阳性）。

1.4 统计学分析

对本临床研究的所有数据采用SPSS18.0进行分析，C-myc表达阳性率以（n/%）表示，并采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺鳞癌及癌旁组织C-myc表达情况

肺鳞癌组织C-myc阳性率为70.59%（36/51），高于癌旁组织的11.76%（6/51），差异有统计学意义（P<0.05）；不同淋巴结转移状态肺鳞癌组织C-myc表达比较，差异有统计学意义（P<0.05）。

2.2 肺腺癌及癌旁组织C-myc表达情况

肺腺癌组织C-myc阳性率为91.11%（41/45），高于癌旁组织的15.56%（7/45），差异有统计学意义（P<0.05）；不同淋巴结转移状态、组织分化程度、TNM分期肺腺癌组织C-myc表达比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

2.3 肺腺癌及肺鳞癌C-myc表达情况

肺腺癌C-myc阳性率为91.11%，高于肺鳞癌的70.59%，差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

C-myc是原癌基因myc家族中的一员，位于8号染色体，主要发挥刺激细胞增殖、诱导细胞凋亡作用。动物实验证实，C-myc过度表达可造成细胞脱离正常有丝分裂轨道，并诱导静止期细胞进入细胞分裂期，进而引发细胞增殖速度上升，导致肿瘤发生[9]。与此同时，诸多研究表明，C-myc表达的变化与胃癌、胰腺癌等恶性肿瘤的增殖及分化状态具有密切关联，其表达产物在细胞生长、分化及恶性转化中发挥的调节作用也已得到证实[10-11]。

本研究就C-myc在肺鳞癌、腺癌中的表达进行了观察，结果表明，无论是肺鳞癌还是肺腺癌，癌组织中C-myc陽性率均明显高于癌旁组织，说明C-myc参与了肿瘤的形成过程。C-myc原癌基因表达的方式以基因扩增、过表达为主，其异常表达往往在癌变早期即发生，并通过影响细胞生长代谢、周期变化、恶性转化以及刺激血管增生、加剧基因不稳定型，启动肿瘤发生、促进癌性增生[12-13]。

C-myc異常激活的机制包括染色体易位、基因突变、基因扩增、DNA的甲基化等，是导致原癌基因异常高表达、促进细胞恶性转化的主要原因[14]。最新研究发现，C-myc在细胞凋亡过程中亦扮演了重要角色，其过度表达、不适时表达均可造成细胞凋亡加剧，但生长因子存在时，激活扩增的C-myc往往以促增殖作用为主，而细胞内基因调控失衡的加剧亦使得细胞分化进一步抑制，为细胞恶性转化创造了一定条件[15-16]。本研究结果亦显示，C-myc异常高表达与肺鳞癌淋巴结转移状态具有密切关联，说明C-myc阳性肺鳞癌患者具有更高的淋巴结转移风险，但与肺腺癌患者淋巴结转移状态无明显相关性，考虑与肺腺癌普遍伴随着C-myc表达上调有关[17]。表明，C-myc不仅在肺鳞癌、腺癌的发生过程中发挥了重要作用，也是促使肺鳞癌细胞浸润、转移的重要基因，因此，可以认为，早期检测肺鳞癌患者病灶组织C-myc表达能够预测或了解其淋巴结转移状态，为治疗策略的制定与调整提供一定参考，但C-myc表达情况无法预测肺腺癌患者淋巴结转移状态。

Tsai等[18]发现，病灶组织C-myc阳性肺癌患者，其5年生存率明显低于C-myc阴性者，考虑与C-myc阳性者病灶恶性表型转化能力更强、肿瘤细胞增殖速度较快有关，该研究结果亦说明根据C-myc表达情况有望预测患者生存质量，关于这一方面的研究，有待日后大样本、长期随访加以观察。

综上所述，C-myc在肺鳞癌、腺癌病灶中阳性表达率均高于癌旁组织，其在肺鳞癌发生发展、肿瘤细胞的恶性转化中扮演了重要角色，且与患者淋巴结转移具有密切关联，根据C-myc表达情况预测肺鳞癌患者淋巴结转移状态、评估预后质量，有望为临床诊治提供一定参考，值得进一步深入研究。

参 考 文 献

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