TRUST与TP-ELISA同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用

【摘要】目的探讨TRUST与TP-ELISA同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用。方法采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)同步联合检测血清中的梅毒抗体，阳性标本再用明胶凝集试验（TPPA）确证，并对结果进行评价。结果16 383例标本TP-ELISA法检出1019例阳性，阳性检出率为6.22%，经TPPA确证阳性1010例，两种试验结果基本吻合，阳性符合率为99.12%；1019例TP-ELISE阳性标本进行TRUST法检出阳性725例，阳性符合率为71.15%，符合率明显低于TP-ELISA法。结论TP-ELISA试剂的敏感性远远高于TRUST试剂，由于TPPA试剂较贵，操作较繁琐，不利于批量检测，所以无法直接采用TPPA法。TP-ELISA法适用大批量检测血清梅毒抗体。TRUST法可作为病程观察和疗效判断的指标，因此用TP-ELISA结合TRUST同步联合检测血清梅毒抗体。

【关键词】梅毒；TPPA；TRUST；TP-ELISA

梅毒（syphilis）是一种由梅毒螺旋(Treponema pallidum,Tp)引起的、主要经性行为传播的慢性疾病,人类是Tp的唯一自然宿主。梅毒的临床表现多样,而血损害是主要病理特征。梅毒的危险性极大,可致多系统病变而出现不可逆性损害,如心血管梅毒、神经梅毒等；也能经胎盘造成胎儿感染,出现早产、畸形,甚至死胎。因此及时早期地做出诊断并治疗,对控制梅毒的蔓延具有重要意义。

1资料与方法

1.1一般资料

1.1.1标本来源16 383例血清标本来自2009年1月～2009年12月笔者所在医院门诊及住院患者，60例正常对照血清标本来自笔者所在医院健康体检人员。

1.1.2试剂TRUST试剂由上海荣盛生物技术有限公司提供,TP-ELISA试剂由北京万泰生物药业股份有限公司生产，TPPA试剂由日本株式会社生产。所有试剂均在有效期内使用，严格按说明书进行操作。

1.1.3仪器FWZ-Ⅱ恒温微量振荡器、Egate2310洗板机洗板、RT-2100C酶标仪、MM-4型性病振荡器。仪器均正常使用。

1.2方法用TRUST、TP-ELISA法同步联合检测16 383份血清标本中的梅毒抗体,阳性标本再用TPPA法确证。

1.3统计学方法结果比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

60份正常对照血清标本TRUST、TP-ELISA二法检测均为阴性；16 383例标本TP-ELISA法检出1 019例阳性，阳性检出率为6.22%，经TPPA确证阳性1 010例，两种试验阳性符合率为99.12%；1019例TP-ELISE阳性标本进行TRUST法检出阳性725例，阳性检出率为4.42%，阳性率明显低于TP-ELISA法。检测结果见表1。

3讨论

结果显示:TP-ELISA法与TPPA法有99.12%的阳性符合率，而TRUST法与TP-ELISA法只有71.15%的阳性符合率，用TP-ELISA法筛查出梅毒抗体阳性率明显高于TRUST法,因为TP-ELISA法是将基因重组表达的梅毒螺旋体特异性抗原包被微孔板,用双抗原夹心法测定梅毒特异性抗体的一种较新梅毒血清学诊断方法,张华荣等［1］曾报道对5种梅毒血清学方法检测效果评价中TP-ELISA法显示出高灵敏度和高特异度。目前临床上检测梅毒的方法有非特异性抗体和特异性抗体检测两种方法,非特异性抗体检测有RPR、TRUST法等；特异性抗体检测有TP-ELISA、TPPA、TPHA法等。TRUST灵敏度和特异性均低于TP-ELISA、TPPA，存在一定的假阳性率和假阴性率。因为TRUST的检测原理是采用牛心磷脂作为抗原的非特异性检测，非特异性抗体在一期梅毒约感染后6周增加，特别是对早期梅毒的辅助诊断能力差，因此不适于早期梅毒的辅助诊断，TRUST法只对二期梅毒有较高的诊断价值,对治疗期间或处于非活动期的梅毒检出率也低,易出现假阴性；而TP-ELISA和TPPA均具有较高的敏感性和特异性。

TPPA作为梅毒抗体检测的确证方法，有着很高的敏感度和特异性，特别适用于潜伏期梅毒及非特异性抗体阴性,又高度怀疑为梅毒患者，但该法反应时间较长,试剂价格昂贵,且结果判断难以自动化。TP-ELISA是利用重组梅毒螺旋体的特异性抗原包被酶标板孔,并采用双抗原夹心法检测血清标本中的梅毒特异性IgM和IgG抗体,对早期和晚期梅毒都有较高的检出率，有较高的敏感性和特异性,TP-ELISA法可用酶标仪判断结果,结果较为客观,原始数据易于保存,且与TPPA的相关性好［2,3］，可替代TPPA检测梅毒血清抗体。然而由于TP-ELISA试验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG或IgM抗体，IgG抗体即使患者经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不消失，血清反应持续存在阳性，故TP-ELISA阳性只说明正在感染或曾经感染过，不能判断梅毒疾病活动与否，所以不能作为疗效监测手段。故对梅毒的诊断必须结合临床表现，否则，可能导致临床误诊，同时增加患者的不必要治疗、用药和心理负担。

患有隐性梅毒的妇女,不易引起患者和医务人员的注意,若在孕前不加以及时治疗,可导致胎传梅毒的发病率大幅增加。TP-ELISA法的敏感性和特异性均较高；TRUST法适用于疗效观察、梅毒复发和再感染的诊断,有助于判断梅毒复发及再感染。因此采用TP-ELISA和TRUST进行同步联合检测,既可提高梅毒检出的阳性率,减少早期梅毒以及潜伏梅毒的漏诊，同时也大大减少由生物学假阳性造成的误诊;又可作为病程观察和疗效判断的指标,以便早期梅毒和早、晚期潜伏梅毒患者能得到及时有效的诊治,做到早发现、早诊断、早治疗,从而能更好地控制梅毒的传播。

参考文献

［1］张华荣,董国富,雷红宇,等.5种梅毒检测方法的应用评.中国国境卫生检疫杂志,2007,30(4):193-204.

［2］周洪伟,林松.3种方法检测梅毒螺旋体抗体的比较.微生物学杂志,2005,25(3):99-100.

［3］李炎梅.两种梅毒血清学诊断试验TRUST和TP-Ab联合检测的临床价值.中国医学创新，2009，6（4）:102-103.

【收稿日期】2011-05-30

（本文编辑：陈春梅）