糖化血红蛋白检测及临床意义

摘要：糖化血红蛋白（HbA1C）是用于糖尿病评价治疗方案有效性的金标准。并因HbA1C还是反应长期血糖变化的稳定指标而成为目前诊断糖尿病研究的热点。这个反映长期血糖控制状况的金标准和糖尿病的重要手段，可以在临床上更好地应用指导糖尿病的治疗。

关键词：糖化血红蛋白临床检测

【中图分类号】R4【文献标识码】B【文章编号】1008-1879（2012）11-0134-02

糖化血红蛋白HbA1c作为糖尿病筛选、诊断、血糖控制、疗效考核的有效检测指标，在临床中得到了广泛的使用，其理由有二个：目前HPLC法测定HbA1c使其准确性和重复性得到很大的提目前，糖化血红蛋白HbA1c作为糖尿病筛选、诊断、血糖控制、疗效考核的有效检测指标，在临床中得到了广泛的使用。

1HbA1C概述

在HbA1C与糖尿病关系的研究中，Rahbar在1968～1969年的研究中发现快速泳动的Hb实际上与HbA1C的结构相同，在糖尿病患者中其浓度增加2～3倍。从而确定了HbA1C与糖尿病之间的初步关系并在以后的临床研究中证实了HbA1C可作为糖尿病患者长期血糖控制的指标，这与糖尿病慢性并发症的发生及发展有密切关系。HbA1C与空腹血糖、过去数周的平均血糖水平等有关。正常人维持一定的血糖水平，就会形成正常范围内的HbA1C，当血糖浓度增加时，其β链上的糖基化位点数目也增加，据此HbA1C是判断血糖控制程度的很好的指标。

糖化血红蛋白是红细胞中血红蛋白与葡萄糖持续且不可逆地进行非酶促蛋白糖基化反应的产物。其寿命与红细胞一致。人体内红细胞的寿命一般为120天，在红细胞死亡前，血中HbA1C含量也会保持相对恒定。因此，HbA1C水平反映的是检测前120天内的平均血糖水平。与采血时间、是否空腹及使用胰岛素等无关，是判断糖尿病患者长期血糖控制好坏的重要指标。

2诊断糖尿病检测指标的比较

2.1血糖有波动性、瞬间性特点，反映的是某一点（测定当时）的血糖水平，变异率高、重现性差，不能反映患者全天血糖变化情况，是糖尿病微观控制的指标。

2.2糖化血清蛋白（GSP）/糖化白蛋白（GSA）半衰期较短（1～3周），只能评价近期血糖控制水平，且血液蛋白质浓度发生变化时其测定结果受影响。

2.3HbA1C检测便捷、标本采集方便，不需空腹，可在任意时间采集并保持相对稳定，变异率低，个体内日间差<2%。测定反映的是过去2～3个月血糖平均水平，是糖尿病控制的宏观指标。

2.4HbA1C与糖尿病并发症（如微血管病变、大血管病变、死亡）有关，而HbA1C降低可以明显改善糖尿病并发症发生的风险。因此，HbA1C是反映糖尿病患者血糖长期控制水平的金标准。

3糖尿病的临床检测方法

由于HbA1C在检测前不稳定性很小，生物变异率低，是一项更稳定的生物学指标，临床广泛采用诊断糖尿病。测定GHb主要是利用GHb和Hb的物理化学性质的不同而进行的，目前主要的检测方法有5种：

3.1离子交换高效液相色谱分析法。基于Hbb链N末端缬氨酸糖化后所带电荷不同而建立。在中性pH条件下，HbA1c携带的正电荷相对较少，因此可通过HPLC法将其与其它组分区分开，得到分离。此方法曾应用于美国DCCT的研究，是目前检测HbA1c的金标准。

3.2微柱法。微柱内的阳离子交换树脂（如Biorex 70）在PH近7时解离后带阴电荷，而Hb解离后带阳电荷，二者可形成离子键。由于GHb的阳电荷比HbA少，与树脂的结合力相对低，容易被洗脱。用分光光度计分别测定洗脱液中GHb和溶血物中总Hb的吸光率（A），可计算出GHb占总Hb的百分比（%）。但此方法的影响影响因素比较多：

（1）洗脱温度对结果有较大影响。

（2）抗凝剂肝素能使测定结果增高。

（3）某些血红蛋白如HbF异常增加时，也会与糖化血红蛋白同时洗脱，从而使结果产生偏差。

3.3电泳法。胶体颗粒在一定条件下可以带有电荷，带有电荷的胶体颗粒可以借静电吸引力在电场中泳行，带正电荷者泳向负极，带负电荷者泳向正极，此种现象称为电泳。血清中各种蛋白质都有它特有的等电点，各种蛋白质在各自的等电点时呈中性状态，它的分子所带正电荷与所带负电荷量相等。但此方法学的弱点是：

（1）需成批进行样本分析，速度比较慢，无法进行实时检测。

（2）自动化程度低，急诊插入、自动维护等功能比较欠缺。

3.4亲和层析法。利用生物高分子能与相应的专一配基分子可逆结合的原理将配基通过共价键牢固地结合于固相载体上制得亲和吸附系统。带有杂质的高分子分离目的物在一定条件下，能以某种次级键与已固相化的配基结合，而杂质则不吸附，除去杂质后变换条件，又可以使待分离的高分子物质重新解离，获得纯化。

除葡萄糖外，血液中所有的糖类都可与Hb相结合，因此该方法的检测结果为糖化血红蛋白总量，而不是HbA1c的含量。

3.5免疫法。使用单克隆或多克隆抗体直接测定血红蛋白β-链上糖基化的N末端的4～8个氨基酸，因此对HbA1C上的糖基特异性好。

但是许多同源的糖化血红蛋白变体也有相同的N末端结构，从而会对结果造成干扰。在定标方面，需与HPLC作相关校正。

综合现在临床实验室中常用的GHb测定方法，因为原理的不同，测定的结果准确度、重复性都有所差异。相信随着对HbA1c实验方法标准化的重视和提高，HbA1c项目的检测在临床会得到越来越多的应用。

4HbA1C检测的质量保证

4.1制定标准化计划，参加室间质量评价，使用经过认证的方法（仪器）并进行精密度、准确度及线性范围评价。

4.2检测人员具有相应的专业任职资格，并经生物安全培训，定期业务学习，所用仪器、试剂应符合要求。

4.3做好室内质量控制，严格按室内质量控制标准操作规程执行。

4.4编写HbA1C检测标准操作规程，并按规程操作。

4.5完善各种相关记录。

综上所述，我们只要严格按照要求去做，HbA1C的检测质量才会提高，才会得到更好地结果，才能更好地服务于临床和患者。