关于公共用具的微生物检验的质量控制的要点探讨

【摘　要】本文主要分析了公共用具的微生物检验的质量控制要点，从人员，环境，器具，检验过程，检验质量，样品保存以及检验报告结果控制几个方面进行了分析。

【关键词】公共用具的微生物；检验；质量控制；素质；培养基公共用具卫生微生物检验数据的可靠性、可比性直接关系到公共用具卫生日常监督的科学性、权威性以及传染源疾病预防与控制的有效性，所以，公共用具的微生物检验至关重要，一定要把好、把对检验关，为公共用具的使用安全、卫生、符合公共场所卫生标准的提供科学依据。保证公共用具的微生物检验的准确，真实，就应该要从人员，环境，器具设备，检验操作等几方面进行质量控制。

1.检验方法的确认

检验方法的确认是公共用具的微生物检验质量保证的首要条件。检验方法错了，大有可能造成检验结果的重大差异。因此微生物检验人员拿到样品，在检验前首先要确认所检样品执行的标准是否现行有效，然后严格按照标准规定的检验方法进行检验。

2.检验人员

随着对微生物检测要求的不断提高，对实验室工作人员也提出了新的要求。首先，要有良好的职业道德，有严谨的工作态度和高度的责任心，要有爱岗敬业的意识；其次，对实验室人员应定期组织培训和进修学习，积极参加学术交流，使他们及时掌握新理论、新技术、新方法，以提高卫生检验水平。在实验室内部，将定期考核纳入管理体系，以定期测试其检验能力及标准熟练程度。通过各种方式使工作人员掌握检验方法及标准，计量和质量保证体系等各方面知识，不断提高检验人员的综合素质。

3.检验环境的控制

实验室清洁卫生及消毒工作应符合检验室规范要求，严格无菌操作，避免室间污染和实验室感染发生。应有合理完善的卫生管理制度，每天坚持做好环境卫生工作，定期对环境进行消毒和检测，以达到质量控制的要求。经过培养后的培养物，经无害化处理后方可排放、洗刷。对染菌物品及废物，应经过消毒灭菌后才可清洗或废弃，防止污染环境。微生物检验室是进行公共用具微生物学检验的地方，应单独设置，操作区与办公区应分开，避免污染。一般应设有准备室、培养室、无菌室、洗涤室、消毒室。试验室要有足够的光线，通风良好，最好设置感应自来水笼头洗手池和固定的消毒设施。无菌室要设有套间或缓冲间，最好设有推拉门，以防止空气振动荡。

4.仪器设备

微生物实验室常用的仪器设备均应按生产厂家提供的方法和有关规定正确使用。对于连续工作的仪器，每天都应进行温度监控和记录并定期维护，以保证仪器处于良好的工作状态。需要强制性定期检定的仪器和设备，经符合资历的计量部门校准合格后方可使用。

4.1高压灭菌器

操作人员应了解蒸气灭菌的原理并遵守操作规则。放入的灭菌物品不宜放得过挤。灭菌完毕，不得立即开盖取物应关闭电源待压力自然降至零时，方可开盖。

4.2干热灭菌器

应遵守操作规则，放入箱内灭菌的器皿之间应有一定的距离，器皿与内层底板不能直接接触。灭菌完毕，不能立即开门取物，须关闭电源，待温度自动下降至50℃以下再开门取物。带有纸包装的物品灭菌温度不能超过160℃。

4.3培养箱

箱内不应放入过热或过冷的物品，取放物品时应随手关闭箱门，以维持恒温。如培养物不慎泼洒到箱内，马上清洁，需消毒的马上消毒。培养物不宜与培养箱最底层直接接触。必要时，可放入装水容器以维持箱内的湿度。每天记录温度及湿度的变化，观察培养箱内温度与设定温度是否一致。在两次计量周期之间要进行内校。

4.4蒸馏设备

定期或不定期清洁蒸馏装置和盛装蒸馏水的容器，每月对蒸馏水进行微生物学质量检验，要求每毫升蒸馏水中细菌数小于50。

4.5显微镜

按说明进行操作。使用油镜后先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用沾上二甲苯的擦镜纸擦拭最后用干净擦镜纸擦干。注意防尘，保持清洁。另外，实验室需要使用的无菌器具应能正确实施灭菌元菌器具和器皿有明显标识，以便与非无菌器具和器皿加以区别。

5.培养基的质量控制

购入新批号干燥培养基时，应用已知标准菌株作质量鉴定，方可使用。配制培养基应有培养基配制记录。配制培养基一般质量要求：

培养基应有明确标记与配制日期。液体培养基应清澈。含倒管者，倒管内应液体充盈，无气泡；固体培养基应保持适当的硬度，接种前无菌落。

不定期抽样检查pH值，要求在规定的pH±0.2内。有指示剂的培养基要保持应出现的颜色。

倾注琼脂平板的体积一般为15ml，斜面不超过2／3。

无菌分装的培养基应在培养箱(36℃)过夜，无菌生长才能使用，高压灭菌培养基应随机抽样5％～10％作无菌试验。

培养基应放在适当温度下保存。

需在有效期内使用，使用时观察培养是否变质。常用培养基质量鉴定要求：用已知特性的、稳定的标准菌株作观察菌进行培养，出现观察指标中状态的培养基，判为合格培养基，使用。否则，不予使用。

6.检验试剂及药品

检验药品、试剂须在分析纯(AR)级以上。在利用药品、试剂配制标准溶液、染色液、缓冲液及其他试剂时应注意：按要求选取溶剂；用带塞的试剂瓶盛装；易分解的试剂宜用棕色瓶；挥发性的试剂瓶口应予密封：如发现溶液有变质现象，应停止使用；标准溶液应定时标定。实验室内保存的试剂应定期进行清点，陈旧或损坏的试剂应弃去，注意保存试剂的使用有效期以及最佳保存方式。

7.检验过程的质量控制

7.1取样

微生物检验样品的采集必须具有代表性，否则检验结果既使准确也会失去使用价值。在准备采样前，要观察样品的外观、包装状态是否有破损等。液体样品采样前要充分摇匀；固体样品粉状的也要充分摇匀，大块状样品则要用无菌采样器从同一包装的几个不同部位分别采取适量样品来检。一般应采取完整未开封的样品，如是散装样品，采集必须在无菌操作下进行，采样的用具应预先经灭菌处理。瓶装检样处理时可用点燃的75％酒精棉球烧灼瓶口灭菌，再用灭菌瓶器开启盖子；袋装样品用75％酒精棉球消毒袋口后进行检验。整个操作应遵循无菌操作程序冷冻样品检验前需解冻，解冻应在45℃下不超过15min或者2℃～5℃不超过18h。

7.2送检时间

样品送到公共用具微生物检验应越快越好，尽量缩短采集到检验的过程时间，对一些特殊要求的样品在送检中要有特殊运送条件。

7.3核对验证

当样品送到检验室时检验人员根据送检单要求的检验项目逐次核对，验收样品的外观、包装状态及样品有无破损、流失、变质、污染。

7.4检验操作

微生物检验必须按无菌操作要求进行。必须穿专用的工作服、帽、口罩、拖鞋，并应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用；进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％乙醇棉球消毒后检验。检测致病菌时，应在生物安全柜里操作。检验过程要认真、负责，严（下转第75页）（上接第60页）格进行无菌操作。操作应细心，避免微生物培养物和液体溅出。如果不慎溅洒在工作台面上或地面上，应立即用有效消毒液浸泡被污染处至少30min，再清洁。实验完毕，应及时清理现场和实验用具，对染菌物品，统一进行消毒灭菌处理。做好微生物环境清洁消毒工作，不留死角。用肥皂、清水洗净双手。

8.参考菌株及其保存

实验室应制定菌种使用、保藏管理制度和标准化操作规程，应涵盖菌种申购、保管、领用、使用、传代和存储等诸方面，确保溯源性和稳定性。另外，实验室还要建立完善的文件记录，做好菌株纸质信息和数字化信息档案并备份，记录好下列信息：菌名(包括学名)、编号、来源、鉴定特征、鉴定时间、鉴定者、传代情况、最适培养基和培养条件、保藏方法等。对保藏的各类微生物菌种，在接收和保藏过程中，为保证菌种质量而对鉴定结果进行的核查，有污染或退化迹象时，要及时分离、纯化、复壮，每次检查都应有详细记录。

9.检验报告及结果质量控制

对原始数据进行整理用回归分析法和方差分析法进行处理，去除不必要的误差，获得准确的虑引入不确定度概念。

上述的微生物学检验报告。必须经过规定的手续进行复查，并对照各类标准对食品卫生的微生物学质量进行全面准确的评价和作出合理的解释。有关人员签字后，加盖检验单位印章，以示生效。这样才使检验结果既有法律依据又有学术依据。　[科]

【参考文献】

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