卵巢癌患者外周血CK7mRNA、CXCL12检测的临床意义

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【摘要】 目的：探讨外周血CK7mRNA、趋化因子CXCL12表达水平与卵巢癌的组织分级、病理分期及腹膜后淋巴结转移等的关系。方法：本次数据分析对象昆明医科大学第三附属医院妇瘤科从2014年7月-2016年5月纳入且收治的44例卵巢癌住院患者的外周血标本，将其作为试验组，良性组为15例上皮性卵巢良性肿瘤患者外周血标本，健康组为18例体检健康女性外周血标本。通过实时荧光定量PCR技术检测外周血中CK7mRNA的表达水平，采用酶联免疫吸附试验测定外周血中CXCL12的含量。结果：在试验组、健康组及良性组中外周血CK7mRNA的表达中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05）;在试验组、健康组及良性组中外周血CXCL12检测中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05）。试验组腹膜后淋巴结有转移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表达高于无转移患者，差异有统计学意义（P<0.05），外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴结有转移患者中表达较高，差异有统计学意义（P<0.05）。CK7mRNA联合CXCL12检测在淋巴结转移中差异显著（P<0.05）。卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表达之间不存在相关性（r=0.222，P=0.148）。结论：在卵巢癌患者外周血中CK7mRNA及CXCL12表达对比健康女性、卵巢良性上皮性肿瘤患者显著更高，且两者之间极有可能对卵巢癌的发展和发生过程进行参与。评估卵巢癌患者术前病情和腹膜后淋巴结转移预测中可以外周血检测CK7mRNA和CXCL12指标为参考依据。

【关键词】 卵巢癌; 外周血; CK7mRNA; CXCL12

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.04.038 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2019）04-00-03

在女性生殖系统恶性肿瘤中，卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统恶性肿瘤中常见的一类恶性肿瘤，发病率较高，且恶性程度较大[1]。卵巢恶性肿瘤患者中大约有90%可能发生上皮性癌。上皮细胞中存在细胞角蛋白（CK）。健康人外周血不存在细胞角蛋白表达，如外周血存在阳性细胞角蛋白基因表达[2]，此时表示外周循环中已经进入恶性肿瘤细胞。基于此，本文就对卵巢癌患者外周血CK7mRNA、CXCL12检测的临床意义进行分析，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究对象为昆明医科大学第三附属医院妇瘤科2014年7月-2016年5月收治且研究的住院卵巢腫瘤患者的外周血标本59例，最大年龄73岁，最小年龄14岁，平均（48.62±3.21）岁。卵巢肿瘤患者中良性患者15例，恶性患者44例;恶性患者临床分期：Ⅰ期患者8例，Ⅱ期患者8例，Ⅲ期患者19例，Ⅳ期患者9例;恶性患者病理分级：5例高分化，6例中分化，33例低分化。卵巢恶性肿瘤患者中有28例存在淋巴结转移，

16例无淋巴结转移。收集2014年7月-2016年5月18例体检健康女性志愿者外周血标本为对照组，最大年龄50岁，最小年龄18岁，平均（40.21±6.211）岁。

1.2 方法

1.2.1 试剂 选取北京天根生化科技有限公司研发且提供的新鲜血总RNA提取试剂盒，美国BIO-RAD公司研发且提供的q PCR试剂盒和c DNA合成试剂盒。光晟生物科技股份有限公司研发且提供的人SDF-1α ELISA试剂盒。

1.2.2 检测CK7mRNA及CXCL12 实施外周血总RNA的提取及逆转录;q PCR采用15 μl的反应体系进行q PCR检测，在美国ABI-7500实时荧光定量PCR仪上进行扩增及检测，其反应条件为：95 ℃预变性3 min，95 ℃变性15 s，60 ℃退火及延伸30 s，40个循环进行。实施CXCL12的检测：使用人SDF-1α ELISA试剂盒对血清进行酶联免疫吸附实验（ELISA）[3-4]，全部操作严格按照说明书要求进行，操作结束时观察颜色变化，试验完毕后采用全波长酶标仪进行测定。

1.3 统计学处理

使用SPSS 17.0软件处理59例住院卵巢肿瘤患者的外周血标本和18例体检健康女性志愿者外周血标本涉及的数据，计量资料以（x±s）表示，采用卡方t检验，多组比较采用方差分析，多组间两两比较采用LSD-t进行检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，采用Spearman等级相关分析两变量间相关性，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组CK7mRNA、CXCL12指标在外周血中的表达情况对比

在试验组、健康组及良性组中外周血CK7mRNA的表达中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05）;在试验组、健康组以及良性组中外周血CXCL12检测浓度中，试验组最高，其次为良性组，健康组最低（P<0.05），见表1。

2.2 卵巢癌临床病理特征和外周血CXCL12、CK7mRNA表达

试验组腹膜后淋巴结有转移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表达高于无转移患者，差异有统计学意义（P<0.05），外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴结有转移患者中表达较高，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 CXCL12和CK7mRNA之间的相关性

卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表达之间不存在相关性（r=0.222，P=0.148）。

2.4 CK7mRNA联合CXCL12检测结果与卵巢癌临床病理特征

试验组卵巢癌患者CXCL12检测结果中位数（3.25）和CK7mRNA表达水平中位数（8.85）设置为CUT OFF值，联合CK7mRNA与CXCL12检测结果对比CUT OFF值视更高显示为阳性，对比CUT OFF值更低显示为阴性。CK7mRNA联合CXCL12检测在淋巴结转移中差异显著（P<0.05），见表3。

3 讨论

在移行上皮（如膀胱）和腺细胞上皮（如卵巢、肺、乳腺等）中细胞角蛋白7发生表达，CK7是上皮细胞及上皮源性恶性肿瘤的标志，可作为上皮性肿瘤的标记物[5]。研究发现，外周血中CK7水平可能与乳腺癌患者微转移及预后有相关性[6]。本研究发现，卵巢癌患者外周血CK7mRNA表达与腹膜后淋巴结转移有相关性，有腹膜后淋巴结转移者表达水平对比无转移者更高，表示卵巢癌患者外周血存在CK7mRNA的高表达，存在较大腹膜后淋巴结转移的可能性，能够为评估患者术前情况提供依据，有利于腹膜后淋巴结转移概率的判断。而和腹盆腔种植情况、年龄、病理分期、组织分级之间不存在相关性。在腹盆腔表面上卵巢癌肿瘤细胞发生种植，外周血循环中进入肿瘤细胞的可能性相对比较低，因此，外周血检测来对腹盆腔种植概率评估存在较小的价值。

在细胞间信息传递中CXCL12-CXCR4生物轴进行参与[7]，和细胞迁移存在一定关系。研究发现恶性肿瘤的侵袭、正常组织向恶性的转化等过程都与CXCL12-CXCR4轴的参与[8-13]。本次分析发现，CXCL12指标在卵巢癌患者外周血中检测浓度对比健康组和良性組显著更高，良性组对比健康组更高，表示卵巢肿瘤进展、发生、恶化，在外周血中CXCL12浓度上表现为不断上升的发展趋势，也就是CXCL12可能对卵巢癌发展和发生过程进行参与。

卵巢癌患者外周血CK7mRNA联合CXCL12检测显示，在外周血CK7mRNA、CXCL12同时高表达，表示存在较大的腹膜后淋巴结转移可能性，较低表达，显示存在较小的腹膜后淋巴结转移可能性。研究结果显示，通过外周血CK7mRNA及CXCL12水平检测可以辅助医师对腹膜后淋巴结转移情况和卵巢癌患者病情进行评估，为临床治疗卵巢癌疾病奠定基础。

参考文献

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