乌鲁木齐市健康人群百日咳抗体水平调查

[摘要] 目的：了解乌鲁木齐市健康人群及产妇针对百日咳的血清特异性IgG抗体水平，为制定免疫策略和防治措施提供科学的依据。方法：随机选取乌鲁木齐市505人作为检测对象, 根据年龄分为9个组: 0～5个月龄(50例)、6～11个月龄(47例)、12～17个月龄(53例) 、18～23个月龄(60例) 、2～3岁(56例)、4～6岁(60例)、7～11岁(60例)、12～14岁(59例)、≥15岁(60例)；此外还随机选取了各60例的配对脐血组和产妇组。取检测对象血清，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定特异性百日咳IgG抗体。结果：百日咳IgG抗体水平2～3岁最高, 0～5月龄最低, 12～14岁组及≥15岁组处于较低水平；同时，配对脐血及产妇组的百日咳IgG抗体水平存在很好的关联性(ｒs=0．79,P<0.05)。结论：应该对年长儿及成人进行百日咳疫苗的加强免疫，从而根除低龄儿童百日咳的主要传染源。

[关键词] 百日咳；IgG抗体；百白破联合疫苗

[中图分类号]R18[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2007）05（c）-029-03

百日咳是由鲍特百日咳杆菌引起的一种急性呼吸道传染病。随着百白破混合制剂疫苗(DPT)免疫覆盖率的逐步提高，全球百日咳的流行得到了有效的控制，发病率和死亡率已经显著下降。但是在我国和一些免疫接种率较高的国家仍有百日咳爆发的报道，百日咳感染仍然处于地方性低水平流行的状态[1,2]；同时，最近十年间年长儿及成人感染百日咳的报道日渐增多,并且认为他们是婴幼儿百日咳感染的主要传染源[3,4]。百日咳的特异性抗体水平可以反映个体以及人群的免疫状况。本文对乌鲁木齐市健康人群及产妇的特异性百日咳IgG抗体水平进行了监测，现将结果报道如下：

1 对象与方法

1.1 调查对象与标本采集

在新疆乌鲁木齐市随机选取505例近3个月无咳嗽、喘息等呼吸道症状的健康人群作为检测对象，根据年龄分为9个组: 0～5个月龄(50例)、6～11个月龄(47例)、12～17个月龄(53例)、18～23个月龄(60例)、2～3岁(56例)、4～6岁(60例)、7～11岁(60例)、12～14岁(59例)、≥15岁(60例)（年龄范围15～64岁，平均26.1岁）；此外还随机选取了各60例的配对脐血和产妇组。各组均取末梢血或静脉血，并在婴儿娩出后即采集脐静脉血2 ml，及相配对的产妇静脉血2 ml。立即分离血清，在-20℃保存待检。

1.2 检测对象的免疫状况

22例<3月龄婴儿未接种DPT联合疫苗，28例3～5月龄婴儿进行了1剂或2剂DPT疫苗接种，47例6～11月龄、53例12～17月龄及19例18～23月龄婴幼儿均全程接种了3剂DPT疫苗， 41例18～23月龄、235例2～14岁人群及12例≥15岁人群接种了＞3剂DPT疫苗，其余48例≥15岁人群以及产妇的DPT疫苗接种情况不详。

1.3 检测方法

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测625份血清的百日咳IgG抗体[3]。在开始实验以前，将试剂盒置于室温环境中；稀释待测血清标本（1∶101；即将1μl待测血清加入到100 μl的稀释缓冲液中）；洗涤缓冲液的稀释（1∶10；即将10 ml的浓缩洗涤液加入到90 ml的去离子水／双倍蒸馏水中）。首先，将100 μl的阴性、临界、弱阳性以及阳性对照血清及已稀释待测血清分别加入相应的包被有特异性抗原的微量孔内，留出一孔作为底物空白孔；箔巾封板后，在室温（18～24℃）下孵育1 h；经含磷酸/磷酸盐缓冲液(PBS)及Tween20的洗涤液反复洗板3次；每孔（除空白孔外）加入100μl过氧化物酶标记的兔抗人IgG抗体；箔巾封板后，在室温（18～24℃）下孵育30 min；经洗涤液反复洗板3次；每孔加入100 μl TMB底物溶液（包括空白孔）；室温、避光放置20 min；按照加底物顺序，每孔加入100 μl TMB终止液（包括空白孔）；52 min内于酶标仪450 nm波长测定消光度值（OD）,在仪器的标准曲线上直接读取待检血清的IgG抗体值,用ELISA单位表示(U/ml)。试剂盒及96孔酶标板由德国IBL生物制品公司提供，操作规程参照使用指南进行。酶标仪为ELHY Lab公司L222568产品。

1.4 统计学分析

用SPSS 12.0软件对实验数据进行统计学分析：应用单因素方差分析对计量数据进行统计学分析；组间比较使用多个样本均数的两两比较的Dunnett－t检验；配对组间的相关分析应用Spearman秩相关分析,P<0．05（所有的P值均为双侧检验）表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄组健康人群的血清百日咳IgG抗体水平

结果显示出本次监测不同年龄组人群的百日咳IgG抗体水平在2～3岁组最高,0～5个月龄最低, 12～14岁组及≥15岁组处于次低水平。其他各年龄组与2～3岁组相比较有显著性差异(P＜0.05)；0～5个月龄组与其他各年龄组比较,除12～14歲组外,与其余组有显著性差异(P＜0.05)；除外0～5个月龄组，12～14岁与其它各年龄组比较，有显著性差异(P＜0.05)；与12～17个月龄相比，7～11岁组、≥15岁组有显著性差异(P＜0.05)；其余各组两两比较，无显著性差异(P＞0.05)，如表1所示。

2.2 配对脐血产妇组的百日咳IgG抗体水平的相关性

配对的各60例的脐血组（x±s：4.77±3.73）与产妇组（x±s：5.03±4.65）存在正相关（(ｒs=0．79,P<0.05)关系。

2.3 不同性别人群的百日咳IgG抗体水平的比较

本次研究共监测505人，其中男性286人（x±s：7.28 ±6.69），女性219人（x±s：6.40±5.61），两组进行比较，其间无显著性差异( P＞0.05)。

2.4 接种不同剂次DPT的婴幼儿百日咳IgG抗体水平的比较

由表2可以看出，接种不同剂次DPT的婴幼儿百日咳IgG抗体水平与已进行加强免疫的18～23个月龄组相比，其余各年龄组有显著性差异(P<0．05)；而未接种和只接种1～2剂DPT的婴幼儿组中抗体水平较低，并且两组间相比较，其无显著性差异(P>0．05)；在6～11个月龄、12～17个月龄、18～23个月龄组中已经完成基础免疫（接种3剂DPT）的婴幼儿中抗体水平则明显增高,未完全免疫的两组与后三组两两比较，有显著性差异(P<0．05)，但全程免疫的三组之间无显著性差异(P>0．05)。

3 讨论

自EPI实施以来，百日咳的发病率与死亡率大幅下降。新疆自80年代初期开始实施计划免疫，目前的免疫覆盖率达95％以上，百日咳发病主要以散发形式为特点。新疆地域广阔，人口相对稀少,居住分散, 疫情发生后不能及时报告和采取有效地控制措施而造成流行；并且人员流动性大，传染源易由外来输入，存在着接种率高发病率相对也高的情况；因而加强免疫监测工作,对预测、预防百日咳显得尤为重要。我们此次对乌鲁木齐地区健康人群及产妇的特异性百日咳IgG抗体水平进行了监测，以了解个体以及人群的免疫状况。

本次研究结果表明,IgG抗体水平在2～3岁组最高,0～5月龄最低, 12～14岁组及≥15岁组处于次低水平。婴幼儿开始接种DPT疫苗后的3～4周,可诱导产生IgG抗体，从而提供针对百日咳的保护作用；1～3剂的基础免疫之后，保护性抗体水平虽有增高，但是仍然处于较低水平，而在第4剂疫苗的加强免疫之后抗体水平明显增高达到高峰[5,6]；但随着年龄的增长,IgG抗体水平逐渐降低，对百日咳的保护作用减弱[7,8]。由此可见,IgG抗体的高峰期可能是进行了DPT的加强接种后所致；0～5个月龄最低, 12～14岁组及≥15岁组处于次低水平，表明在这几个年龄组IgG抗体对百日咳感染的保护力较弱,容易发生百日咳感染,并且这也与百日咳在年长儿及成人中增多的诸多报道相一致[3,4]。因此,为提高对百日咳的抵抗力,应考虑在年长儿及成人中进行百日咳疫苗的加强免疫。

小婴儿尤其是＜1个月的新生儿，对百日咳的易感性最高，并且此年龄组的致死率与致残率均最高。故我们检测了60例配对的脐血、孕妇组的百日咳IgG抗体水平,据结果显示脐血、孕妇组的百日咳IgG抗体水平均较低,但是存在正相关性。这表明通过母亲的免疫作用可以给新生儿提供针对百日咳的保护。因此,可以对孕妇进行加强免疫,提高其抵抗力,从而给新生儿提供抗体抵御百日咳感染的侵袭[9,10]。

我们对不同性别人群的百日咳IgG抗体水平进行了比较，结果显示差异无统计学意义，这表明在百日咳IgG抗体水平的差异中性别因素没有影响。

我们还对接种不同剂次DPT后IgG抗体水平进行比较结果表明:接种不同剂次DPT的婴幼儿百日咳IgG抗体水平与已进行加强免疫的18～23个月龄组相比，其余各年龄组有显著性差异(P<0．05)，；而未接种和只接种1～2剂DPT的婴幼儿组中抗体水平较低，并且两组间相比较，无显著性差异(P>0．05)；在6～11个月龄、12～17个月龄、18～23个月龄组中已经完成基础免疫（接种3剂DPT）的婴幼儿中抗体水平则明显增高,未完全免疫的两组与后三组两两比较其有显著性差异(P<0．05)，但全程免疫的三组之间无显著性差异(P>0．05)。这表明已经完成基础免疫（接种3剂DPT）和加强免疫接种之后抗体水平较高。

通过此次调查，我们发现IgG抗体水平在2～3岁组最高,0～5个月龄最低, 12～14岁组及≥15岁组处于次低水平；同时在全程接种组与未接种或未全程接种疫苗的婴幼儿组中抗体水平也有明显的差异；并且加强免疫之后抗体水平达到高峰,可有效预防百日咳的发生。由于未接种或未全程接种疫苗,≤5个月婴儿抗体水平最低,是感染百日咳的最易感年齡组。目前一致认为年长儿和成人百日咳患者是婴幼儿的主要感染源[3,4]，应用预防接种手段切断婴幼儿的百日咳传染源是非常重要的,由此在年长儿及成人中进行百日咳疫苗的加强免疫是非常必要的；同时由于脐血、孕妇组的百日咳IgG抗体水平存在正相关关系，可以通过对孕妇进行加强免疫的方式提高新生儿百日咳特异性抗体，预防感染。

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(收稿日期：2007-03-26)

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